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扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus的快速检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310409878.6, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人:  宋林生;  邱丽梅;  刘瑞;  张峘
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一种扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus的快速检测方法  其特征在于:以待检测的过滤海水样品中细菌基因组总dna为模版  其中所述的引物为:16s rdna:上游引物16srtf:5’‑agaaccttacctactcttgacatcc‑3’  利用细菌16srdna保守区域和致病性灿烂弧菌金属蛋白酶基因的特异性的引物进行荧光定量pcr扩增和定量分析检测养殖环境中扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus  下游引物16srtr:5’‑cccaacatttcacaacacga‑3’  金属蛋白酶基因:上游引物spf1:5’‑atggcacaagggatcagcgg‑3’  下游引物spf2:5’‑ggataagaggaagcgataaagaa‑3’。  
一种BAC DNA指纹分析的标记方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010280134.5, 申请日期: 2012-04-04, 公开日期: 2012-04-04
发明人:  相建海;  张晓军;  郇聘;  赵翠;  李富花;  王兵
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一种bac?dna指纹分析的标记方法  其特征在于:1)将bac?dna样品采用限制性内切酶进行酶切  2)采用一种荧光标记的dutp和taq?dna聚合酶对酶切后的bac?dna片段进行标记  得酶切的bac?dna片段  然后即可用于abi测序仪上进行dna片段分析。  
一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
发明人:  崔朝霞;  张姝;  栾维莎;  刘媛
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一种海蜇基因组dna提取方法  其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存  2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆、30~40ul质量浓度为10%的sds、3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k  封口后55~56℃消化0.8~1.0小时  3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6m?nacl  待用  振荡浑匀20~30s  10000~12000rpm离心20?30分钟  吸上清  而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇  ?20~?18℃沉淀10~15分钟  沉淀后取出  以10000~12000rpm离心15?20分钟  弃去液体  并用体积浓度为70%的乙醇  离心洗1~2次  自然室温凉干  即得到海蜇碟状体的dna。  
一种海蜇基因组DNA的提取方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200710015295.X, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14
发明人:  崔朝霞;  张姝;  栾维莎;  刘媛
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1.一种海蛰基因组dna提取方法  其特征在于:1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织  2)将步骤1)得到的原料内加入3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k  加入ctab Buffer300~400ul  在55~56℃消化24~26小时至溶液澄清  3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚、氯仿和异戊醇的混合溶液混匀  待用  待用  离心  而后向上清液中加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇  吸上清  -20~-18℃沉淀10~15分钟  其中苯酚、氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1  再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀  沉淀后取出  氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。  离心  离心  吸上清  弃去液体  并用体积浓度为70%的乙醇  离心洗1~2次  将多余液体倒去室温自然凉干  即得到海蛰螅状体的基因组dna