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| 进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 于洋 ; 李富花; 张晓军; 相建海
 Adobe PDF(6162Kb) |  收藏 | 浏览/下载：358/2 | 提交时间：2014/08/04
进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系 包括多重微卫星引物体系 其特征在于：使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系 所述的两个多重微卫星引物体系如下：1）多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为：lvm1f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2）多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下：lvm11f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。 |
| 一种累代选育对虾新品种的鉴定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210384634.2, 申请日期: 2013-01-23, 公开日期: 2013-01-23
发明人: 相建海; 于洋; 张晓军; 李富花
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一种对累代选育对虾新品种的鉴定方法 其特征在于：采用线粒体控制区的引物扩增并测序待鉴定群体的线粒体控制区 将扩增所得线粒体控制区序列符合累代选育群体单倍型的待鉴定群体再利用5对微卫星位点引物进行扩增 所述5对微卫星位点引物为：引物名序列引物名序列khv1f5’?ttaccgcctaagagcgaatg?3’khv1r5’?tgtcctttcgtaccagtcaag?3’khv2f5’?gatgtacacaactgtacttcg?3’khv2r5’?gagatgataagagaacgaaag?3’khv3f5’?gagagcaaataagaaagggc?3’khv3r5’?aggatgcaaatgataacgag?3’khv4f5’?cgaagagatttatccaggg?3’khv4r5’?cgtgcattattatcctttcc?3’khv5f5’?atgctgcatcatctctgac?3’khv5r5’?aggaaaagacggtgaaatag?3’ 将扩增所的产物进行微卫星分型 而后利用微卫星分型数据进行判别分析 进而得到累代选育对虾新品种 |
| 一种BAC DNA指纹分析的标记方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010280134.5, 申请日期: 2012-04-04, 公开日期: 2012-04-04
发明人: 相建海; 张晓军; 郇聘; 赵翠; 李富花; 王兵
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一种bac?dna指纹分析的标记方法 其特征在于：1)将bac?dna样品采用限制性内切酶进行酶切 2)采用一种荧光标记的dutp和taq?dna聚合酶对酶切后的bac?dna片段进行标记 得酶切的bac?dna片段 然后即可用于abi测序仪上进行dna片段分析。 |
| 一种链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261766.7, 申请日期: 2011-04-13, 公开日期: 2011-04-13
发明人: 陈英杰; 秦松; 刘少芳; 崔玉琳; 姜鹏; 陈华新; 李富超
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一种链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒的制备方法 其特征在于：1)通过pcr反应将strep?ii标签基因分别连在别藻蓝蛋白apc的α和β亚基脱辅基蛋白基因的n末端 2)将strep?ii?apca基因片段插入到带有6×his基因的载体a中6×his基因的下游 分别得到strep?ii?apca和strep?ii?apcb基因片段 同时将藻胆素生物合成酶基因hol和pcya插入到载体上 将strep?ii?apcb基因片段插入到带有6×his基因的载体b中6×his基因的下游 待用 得到pcdf?strep?ii?apca?hol?pcya 同时将色基裂合酶基因cpcs和cpcu插入到载体上 3)将步骤2)所得两个表达载体同时转化大肠杆菌 待用 得到prsf?strep?ii?apcb?cpcs?cpcu 筛选获得同时表达上述基因的工程菌 4)将上述工程菌诱导培养后分离纯化 待用 得到双标签重组apc荧光蛋白质 5)将所得双标签重组apc荧光蛋白质与锌离子修饰的超顺磁性硅壳纳米颗粒振荡混合 即得到链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒。 |
